Muzeum Historii Tarnowa i Regionu mieści się w dwóch renesansowych kamienicach zlokalizowanych przy północnej pierzei tarnowskiego rynku, zbudowanych w XVI wieku. W połowie XVII wieku popadły w ruinę a w XVIII wieku obie kamienice trafiły w ręce szkockiej rodziny Rhodów. Budynki wielokrotnie zmieniały właścicieli. Jedna z kamienic numer 21 w latach 1767 – 1788 należała do Mateusza Morozowicza, ówczesnego Pocztmagistra Jego Królewskiej Mości i Rzeczypospolitej. Po rozbiorze Polski zyskała numer 100 i była kwaterą generała Ryszarda d’Altony.  Druga kamienica numer 101 również służyła celom wojskowym. Kolejni żydowscy właściciele przekształcali i przebudowywali kamienice, przez co traciły one swój renesansowy charakter. Rekonstrukcję rozpoczęto w okresie II wojny światowej. Przywrócono wówczas dekorację malarską budynku numer 20 a po wojnie odbudowano attyki obu kamienic. Muzeum powstało w 1949 roku w budynku numer 20 a w 1975 roku przejęło również budynek numer 21. Uwagę przyciągają elewacje frontowe oraz zabytkowe obramienia okien oraz portale. Prace konserwatorskie pozwoliły na odkrycie i odnowienie dekoracji malarskich wnętrz. Wyjątkowe są polichromie zdobiące frontowe pomieszczenia. Są to malowidła renesansowe. Reprezentacyjne narożne pomieszczenie na I piętrze pokazuje jakim zmianom ulegała dekoracja malarska. Jest to przekrój od XVI do XIX wieku. Wyjątkowa jest również klatka schodowa zwieńczona kopułą z latarnią, z malowidłami z XVIII wieku.

Przygotowana w zabytkowych wnętrzach ekspozycja wprowadza zwiedzających w barwną i ciekawą historię miasta i regionu. Gospodarzem i przewodnikiem po dziejach Tarnowa jest kataryniarz. Podążając ścieżką po perforowanej taśmie katarynki zwiedzamy kolejne pomieszczenia, gdzie znalazły się najciekawsze i najcenniejsze obiekty ze zbiorów tarnowskiego muzeum. W sali „pod orłem” na zwiedzających czekają wyjątkowej wartości dokumenty pergaminowe, a w zbrojowni średniowieczne miecze. Przechodząc przez klimatyczne piwnice, trafimy do czasów prehistorycznych, odwiedzimy gospodę cechową, znajdziemy się w tramwaju, przez którego okna będziemy mogli podejrzeć dawny Tarnów, przeniesiemy się również w czasy II wojny światowej i PRL. Na najwyższym piętrze wystawy ukazane zostały charakterystyczne dla miasta budynki i wybitne postacie. Znajdują się tam również odwołania do wielowyznaniowej przeszłości Tarnowa. 

Obiekt posiada certyfikat Miejsce Przyjazne Rowerzystom.