Objęta ochroną ścisłą druga co do wielkości dolina znajdująca się na terenie Ojcowskiego Parku Narodowego. Bardziej dzika i rzadziej odwiedzana od Doliny Prądnika. Trasa spacerowa ma długość około 5 kilometrów i oznakowana jest kolorem żółtym. Warto przebyć ją od Sąspowa w kierunku Ojcowa. Górną część doliny pokrywają wiejskie zabudowania, a dolna jest mocno zalesiona. Dnem przepływa potok o pierwszej klasie czystości wód zasilany licznymi źródłami. W końcowym fragmencie znajduje się wodospad o wysokości niespełna sześciu metrów. Zbocza usiane są wapiennymi ostańcami i niewielkimi jaskiniami. W jednym z takich schronisk odkryto najstarsze szczątki człowieka w Polsce. Na terenie doliny znajduje się Wąwóz Jamki objęty ochroną ścisłą. Kiedyś dolina Sąspowska była zamieszkała, dziś nie ma na jej terenie żadnych zabudowań mieszkalnych ani pól uprawnych.